臭氧设备对空气消毒效果的评价

臭氧设备对空气消毒效果的评价

B.1.1 实验器材和设备
（1）试验菌株：一般选择金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)ATCC 6538株，用其4－14代培养物。推荐用于特殊场所，例如用于结核病等消毒的臭氧发生器或臭氧消毒设备，应增加测试相应的微生物。注明具有杀真菌作用者，应加测白色念珠菌(Candida albicans)ATCC 10231株。
（2）菌悬液的制备，参照卫生部《消毒技术规范》执行。
（3）采样液和稀释液：磷酸盐缓冲液（PBS，0.03mol/L,pH 7.2）。采样液中应含有中和剂。
（4）采样器：采用液体冲击式采样器或多级筛孔空气冲击式采样器。
（5）中和剂及选择方法：一般采用含硫代硫酸钠的中和剂，参照《消毒技术规范》第三版第一分册《实验技术规范》2.4选择合适的中和剂浓度。
（6）培养基：对金黄色葡萄球菌，采用普通营养琼脂培养基；对白色念珠菌采用沙堡氏培养基；对其它特殊试验菌，选用相应的培养基。
（7）空气消毒试验柜（或试验室）：实验室试验一般采用1m3的试验柜，试验柜中间高度应有喷菌和采样孔，如果臭氧消毒设备较大，可采用20 m3左右的大试验柜。模拟现场试验应采用>20 m3的气溶胶试验室。≥20 m3试验室在离地面1.5m高度应有喷菌和采样孔。试验柜室内应有控制温度、湿度的设备。
（8）喷菌装置：包括气溶胶喷雾器（要求喷出的粒子90％以上直径在1－10μm），空气压缩机（带有压力表的控制装置）、气体流量计等。
B.1.2 试验方法
     （1）调整试验室内的温度、湿度，并使其稳定在规定范围内（温度20±2℃，相对湿度70－90％）。
（2）按预试验选定的喷菌压力、气体流量和喷菌时间，同时向试验柜（室）和对照柜（室）喷菌。喷菌后，同时开柜（室）内的风扇，使细菌气溶胶在柜（室）内分布均匀。喷菌完毕后，继续开风扇5分钟，然后静置5分钟。务使试验柜（室）内的菌数达到5×105～5×106cfu/m3，在自然衰亡率高时，可适当增加喷入菌量。
（3）采样：喷菌停止后10分钟，按预试验选定的压力和时间，同时对试验柜（室）和对照柜（室）采样，作为0分钟样本。
（4）消毒：试验柜（室）开启臭氧消毒设备，使其产生臭氧，并记录时间。
（5）采取消毒后样品，至各预定消毒时间，同时对消毒柜（室）和对照柜（室）采样。
（6）参照预试验获得的参数，对两组采样液进行稀释，并采用平皿倾注法进行接种平皿，放37℃下培养48小时观察并记录各平皿菌落数。（特殊微生物的培养温度和时间，可按规定选定）。同时设同批空白培养基、PBS作阴性对照，接种同批试验菌的培养基作为阴性对照。
（7）样本采完后，对试验柜和对照柜(室)分别进行消毒，抽风，并开门通风。为下次试验作好准
GB  ××××－××××

备。
B.1.3 正式试验重复三次，分别计算各次试验的杀灭率。杀灭率均大于99.9%，可判为消毒合格。从中找出最小合格作用时间。
计算杀灭率公式如下：
 
式中：Nt为对照柜中试验菌的自然衰亡率，
 
两式中：V0和Vt分别为对照组于0分钟和试验开始后不同时间采样回收的菌数。
Pt是不同消毒时间的杀灭率
Vo’和Vt’分别为试验组消毒前（0分钟时）和消毒至不同时间采得的存活菌数。
B.1.4 现场试验（或应用试验）
    （1）本试验根据推荐使用的条件设计，选择合适大小的房间（根据臭氧消毒设备产生臭氧量，通风量等来选择），将臭氧消毒装置安装在合理位置（一般为靠墙中间），室内可以曾有人活动，但试验时室内必须无人。
（2）以室内自然菌为试验微生物。采集的空气中细菌数应>102cfu/m3。
（3）先采取消毒前空气样品，然后开臭氧消毒装置，并于不同时间（或推荐采用的某一时间）采取消毒后空气样品。
（4）采样培养基为普通营养琼脂培养基，采样方法可用多级筛孔空气冲击式采样器采样，或用平皿沉降法采样。前者要求采样器置室中央1 m高处，房间大于10 m2者，每超过10 m2增设一个采样点。后者按《消毒技术规范》执行。
（5）培养：采样后的培养基送37℃，48小时培养后观察并记录结果。
（6）计算杀灭率：用多筛孔采样器，可用下述公式计算细菌消亡率：
 
用平皿沉降法采样，可按《消毒技术规范》第三版，第二分册《医院消毒技术规范》第20.7条计算消亡率。
（7）试验重复三次，各次细菌消亡率均≥90％为合格。